非编码RNA（ncRNA）的研究进展揭示了它们在编码功能性多肽方面的能力。这些由ncRNA编码的多肽在生理和病理状态的调控中发挥重要作用。在三阴性乳腺癌（TNBC）中，一些由ncRNA编码的微肽已被鉴定参与了肿瘤生长、转移和治疗抵抗等关键的癌变过程。这些研究表明，ncRNA的编码功能为发现TNBC特异性治疗靶点提供了宝贵的资源。此外，经典的开放阅读框（ORF）通常以AUG作为起始密码子，但许多真核细胞中的编码产物使用非AUG密码子（如CUG、UUG、GUG、ACG、AUA和AUU）进行翻译起始。这些由非AUG起始密码子编码的产物值得关注，尤其是癌蛋白c-Myc，其合成从MYC癌基因转录本中的CUG起始密码子开始，并在多种癌症的发生和发展中发挥重要作用。
中国科学院昆明动物研究所蒋德伟、昆明医科大学陈策实、中山大学张弩等人发现并验证了一种由长链非编码RNA（lncRNA）CDKN2B-AS1编码的新型小肽66CTG，该小肽通过稳定c-Myc蛋白来促进三阴性乳腺癌（TNBC）的生长。相关内容以“A novel peptide 66CTG stabilizes Myc proto-oncogene protein to promote triple-negative breast cancer growth”为题发表在《Signal Transduction and Targeted Therapy》上。
【主要内容】
66CTG的发现与鉴定
作者通过分析乳腺癌细胞的核糖体RNA测序数据，结合TCGA、ORFfinder和SmProt数据库，发现lncRNA CDKN2B-AS1在TNBC中显著上调，并且能够编码一个66个氨基酸的小肽66CTG，其翻译起始密码子为CUG。利用CRISPR-Cas9基因编辑和质谱分析，作者在TNBC细胞中确认了66CTG的内源性表达，证实了其真实存在。
图1 CDKN2B-AS1 编码的 66CTG 促进 TNBC 细胞增殖
66CTG的功能研究
作者在TNBC细胞系MDA-MB-231和HCC1806中过表达66CTG，发现其能够显著促进细胞增殖。通过建立TNBC原位异种移植肿瘤模型，作者发现66CTG过表达能够显著促进肿瘤生长，并且在肿瘤组织中增强了c-Myc和Cyclin D1的表达水平。
图2 66CTG 通过上调 c-Myc/Cyclin D1 轴促进 TNBC 肿瘤生长
66CTG的作用机制
作者发现66CTG能够通过竞争性结合FBW7α，阻止FBW7α对c-Myc的识别和降解，从而稳定c-Myc蛋白。这一过程依赖于66CTG的CPDS56/S60基序，该基序可被GSK-3β磷酸化，进而被FBW7α识别。
图3 66CTG 通过与 FBW7α 相互作用来稳定 c-Myc
图4 FBW7α通过识别66CTG的CPDS56/S60基序介导其泛素化和降解
稳定后的c-Myc能够增强Cyclin D1基因的转录，促进TNBC细胞从G1期进入S期，从而推动细胞增殖。
图5 66CTG 通过上调 Cyclin D1 促进 TNBC 细胞增殖
66CTG和c-Myc之间存在相互保护的稳定作用。c-Myc过表达能够减弱FBW7α对66CTG的降解作用，而66CTG过表达则能够延长c-Myc蛋白的半衰期。
图6 66CTG 通过稳定 c-Myc 的蛋白水平来上调细胞周期蛋白 D1
【全文总结】
66CTG在TNBC中的高表达及其对细胞增殖和肿瘤生长的促进作用，使其成为TNBC诊断和治疗的潜在靶点。研究揭示了66CTG通过竞争性结合FBW7α稳定c-Myc蛋白的新机制，为理解c-Myc在TNBC中的调控提供了新的视角。研究进一步证实了lncRNA编码小肽在肿瘤发生发展中的重要性，为挖掘更多具有生物学功能的lncRNA编码小肽提供了研究思路和方法。
原文链接：
https://doi.org/10.1038/s41392-025-02298-5