【衡道丨干货】病理基础——浆膜腔脱落细胞学
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浆膜
浆膜起源于中胚层,分为脏层浆膜和壁层浆膜,覆盖于各脏器表面的浆膜称脏层浆膜,内衬于各浆膜腔的浆膜称壁层浆膜。浆膜腔包括胸膜腔、腹膜腔和心包腔。正常情况下,这两层浆膜紧密相贴,形成一个密闭的浆膜腔,其内仅有少量起润滑作用的液体,以维持浆膜腔内的器官如心、肺、胃肠的运动正常。
图1 胸膜腔
图2 腹膜腔
图3 心包腔
图4 鞘膜腔
浆膜正常组织学
浆膜表面为间皮细胞,间皮细胞表现出上皮和间充质特征,但在成熟状态下主要表现出上皮样形态,正常静息状态间皮细胞以单层形式存在,间皮下为含有血管和淋巴管的薄层纤维结缔组织。
间皮细胞
1、组织学特征
图5 胸膜表面被覆单层间皮细胞。
图6 腹膜表面为一层相对较薄的小嗜酸性细胞(间皮细胞),衬在成熟脂肪(网膜)或纤维结缔组织的表面。
图7 间皮细胞是小型立方体嗜酸性细胞,具有单个中央核,通常缺乏核仁。下层结缔组织中细长到纺锤形的细胞是浆膜下成纤维细胞
图8 反应性增生的间皮细胞
图9 腹膜中反应性增生的间皮细胞,细胞核增大,并形成明显的核仁,也可以看到有丝分裂
图10 腹膜增生的间皮细胞能够形成简单的乳头状结构(围绕中央纤维血管轴心的细胞)。当这些结构突出且弥漫时,必须考虑分化良好的间皮瘤。
图11 该患者因慢性附睾睾丸炎引起的顽固性疼痛接受了睾丸切除术。鞘膜的壁层(靠近图像顶部)由规则的扁平间皮细胞排列。脏层显示反应性间皮增生。间皮细胞团也陷入表面下的间质中。
图12 睾丸切除标本中的反应性间皮增生。患者患有慢性附睾睾丸炎引起的顽固性疼痛。浆膜下间质内显示出增生的由间皮细胞排列形成的腺样结构。如果脱离上下文,它们可能会被误认为是浸润性癌。完全没有核间变、坏死或肉眼可见的肿瘤肿块有利于反应过程。
图13 上图高倍显示间质内陷的增生间皮细胞形成腺样结构,如果脱离上下文,可能会被误认为是浸润性癌。完全没有核间变、坏死或肉眼可见的肿瘤肿块有利于反应过程。
2、免疫组化
间皮细胞表达细胞角蛋白(AE1/AE3、CK7、CK5/6、CK8/18)、Calretinin、WT-1、D2-40(podoplanin)、HBME-1、血栓调节蛋白,Desmin(反应增生的间皮细胞)。
浆膜下组织
正常的浆膜下细胞具有成纤维细胞的超微结构特征,表达Vimentin但不表达角蛋白,然而,当这些“多潜能浆膜下细胞” 或“ 间皮下成纤维细胞”在反应性增生性病变时,可同时表达角蛋白和Vimentin,并发生表面分化,符合它们是由间皮细胞进展而来这一概念。
浆膜腔积液
正常情况下,浆膜腔内仅有少量起润滑作用的液体,细胞学检查一般表现为无细胞或仅有少许间皮细胞和炎症细胞。许多疾病可引起过多液体积聚形成积液,其性质也发生改变,此时称浆膜腔积液。按其发生的部位分为胸腔积液、腹腔积液、心包腔积液和鞘膜积液。浆膜腔积液分为漏出液和渗出液。
浆膜腔积液的正常细胞
浆膜腔积液的细胞成分及数量不一,与形成积液的疾病相关。所以,很难精确定义浆膜腔积液细胞数的正常范围。良性积液包含一定数量的间皮细胞、组织细胞和淋巴细胞。由于穿刺取液时往往因损伤造成出血,所以,任何积液中均可有少量污染的血源性细胞、如红细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞等。
巨噬细胞(组织细胞)
巨噬细胞来源于浆膜的组织细胞及血液中的单核细胞。
巨噬细胞大小不一,胞质丰富,着色较淡,染淡蓝色或嗜多色,可以是泡沫状、颗粒状或空泡状,有吞噬现象,可吞噬红细胞、白细胞、其他细胞碎片及异物颗粒,细胞边界模糊,细胞边缘常不规则,可有伪足样状突起。
细胞核偏心,较间皮细胞不规则,常呈肾形、马蹄形,有内切、折叠感,核染色质分布不均匀,呈粗网状,着色偏淡,核仁不明显。
由于积液中巨噬细胞的大小和形态与间皮细胞类似,需要与间皮细胞相鉴别,但它们无相互挤压拥抱,尤细胞间的窗口现象,不形成细胞团。
图14 良性浆膜腔积液中的组织细胞。细胞体积大,胞浆丰富,内含有细小空泡。核大、位于细胞的中央或偏位,核仁小且可有可无。(巴氏染色,高倍镜)
图15 间皮细胞和组织细胞。组织细胞通常与间皮细胞有细胞形态学重叠。当存在于特定细胞中时,其特征包括泡沫状细胞质和缩进或弯曲的细胞核。至少有一个间皮细胞存在(视野顶部),有一个小核仁和位于中央的细胞核
间皮细胞
1、正常间皮细胞
单个散在,圆形或卵圆形,大小不一,与鳞状细胞中的基底层细胞及外底层细胞相似。冲洗液中可见到大片间皮细胞碎片。
胞核居中、或为椭圆形,单核为主,可见双核及多核,核染色质细颗状,分布均匀,可有小核仁。
胞质可呈双嗜性并深染,中央致密,外围有透明外缘(“花边裙”)是细长微绒毛的结果。
细胞之间的空隙(“窗口”)也是由微绒毛引起的。
偶尔会看到细胞内排列(“拥抱”)。
少数细胞中出现细胞质内充满液体的空泡,这些空泡使细胞核向外周移位,多见于退化变性的间皮细胞。
偶尔可见有丝分裂。
图16 间皮细胞。胞浆致密或不透明,细胞核大,见小核仁小,成对出现(或成对的细胞群)的两个细胞之间有具诊断性的 “细胞窗”(巴氏染色,高倍镜)。
图17 间皮细胞和组织细胞。在众多组织细胞的背景中可以看到单个间皮细胞(顶部中心)。间皮细胞具有致密的细胞质和位于中心的细胞核,而组织细胞具有泡沫状细胞质和位于外周的细胞核(巴氏染色)。
图18 良性间皮细胞
图19 良性间皮细胞
图20 间皮细胞。图示一大片单层良性间皮细胞。注意细胞形态单一,相邻细胞间由脆弱纤细的胞浆连接而形成“组织培养”型的外观。大片间皮细胞碎片很难在自发性积液中见到,几乎都是在腹腔冲洗液中见到的
图21 间皮细胞。高倍镜显示细胞形态一致,细胞核大、圆形或椭圆形,核染色质较浅,核仁小,细胞间隙或“细胞窗”相当明显( 巴氏染色,高倍镜)
间皮细胞与组织细胞的鉴别
2、反应性间皮细胞的特点
片状排列、细胞拥挤、大小不一,细胞核增大明显,染色深,通常为圆形,位于细胞中央,核仁单个或多个,可以很明显。尽管胞核大小不够一致,但其染色质分布均匀,核浆比正常或增大不明显。
出现多核间皮细胞,一般3-5个核,胞核略增大,胞质也增多。
特殊排列的细胞群,如梅花状、腺腔样、乳头状、栅栏状、菊形团和其他形式的细胞群均可在涂片中见到。虽排列具特殊结构,看起来像恶性肿瘤细胞,但仔细观察这些细胞群,平铺状、外观无立体结构感。
部分病例反应性间皮细胞可见明显异型性, 一定要与转移的上皮癌细胞鉴别。
图22 反应性间皮细胞增生,几个间皮细胞形成一个小簇,有突出的核仁。在底部中心区域,一个间皮细胞包裹着另一个。
图23 反应性间皮细胞增生。大量良性间皮细胞以单个细胞的形式存在或形成小组织片段。间皮细胞缺乏异型性(如核/浆比高、核深染、大核仁和双核),可借此与恶性间皮瘤细胞鉴别(巴氏染色,高倍镜)
图24 反应性间皮细胞增生伴有异型性。对于这个胸腔积液标本的初步印象是恶性间皮瘤,因为细胞丰富.出现有异型性的间皮细胞,有时伴有明显的核仁、双核或多核,以及完整(尽管很小) 的组织片段。然而须注意:患者是一名21岁的孕妇伴有盆腔血栓性静脉炎和呼吸困难.已确诊有肺梗死(巴氏染色,高倍镜)
图25 反应性间皮细胞增生伴有明显的细胞异型性。注意:完整组织片段中的细胞形成"腺泡"样结构。细胞核大,核浆比高、核仁明显。这种情况下,仔细分析患者的临床病史、主诉和影像学表现至关重要,有助于避免误诊(巴氏染色,高倍镜)。
图26 反应性间皮细胞增生。在大队组织片段中,间皮细胞呈现出“乳头状”结构。在这种悄况下,高分化的恶性间皮瘤很难被排除,然而,这些完整的组织片段更常见于妇产科良性生殖道疾病时(如子宫内膜异位)的反应性间皮细胞增生,通常见于腹盆腔冲洗液标本中,正如上图这个特殊的病例所示(巴氏染色,高倍镜)。
图27 反应性间皮细胞增生。在淋巴细胞、单核细胞的背兼下,出现大量的间皮细胞。间皮细胞具有一定的异型性,包括核/浆比高,核膜不规则,核深染,以及核仁明显。也可见很少量完整的组织片段(巴氏染色,高倍镜)
图28 反应性间皮细胞增生。在上图腹水的细胞学标本中,可以看到大量的"印戒”型细胞,细胞胞浆内单一的大空泡把细胞核推向周边。在浆膜腔积液中出现“印戒”型细胞的首要原因并不是转移性印戒细胞腺癌,而是晚期肝硬化,其本质是增生的非典型间皮细胞。作者已多次在胸腔积液的标本中观察到这种现象,并认为这些“ 假印戒”细胞很可能代表着细胞的退行性变(巴氏染色,低倍镜)。
图29 反应性间皮细胞增生。图示另一个肝硬化患者的细胞学标本,可见“假印戒”细胞(巴氏染色,高倍镜)。
淋巴细胞
淋巴细胞是积液中最常见的白细胞,它们是小圆细胞,胞核圆形深染,无核仁,胞质极少,大多数细胞呈现裸核。淋巴细胞增多提示慢性炎症,如结核、肿瘤或结缔组织病所致渗出液,但并无特异性。
中性粒细胞
中性粒细胞不论在何种涂片染色中均容易辨别,常为三叶核,胞质颗粒不明显。中性粒细胞增多并没有特异性,许多因素均可引起,中性分叶核粒细胞增多常见于化脓性渗出液,细胞总数也常大于1000x106/L。积液中含有中性粒细胞常见于炎症、器官梗死和破裂。
嗜酸性粒细胞
嗜酸性粒细胞比中性粒细胞略大,胞核通常双叶,在DQ染色涂片中可见特征性的亮红色胞质颗粒,而在PAP染色涂片中这种特征不明显,颗粒呈淡橘红色、棕绿色或无色。嗜酸性粒细胞积液常见于气胸,也见于肺梗死、肺炎和肿瘤。
参考资料
1.《非妇科脱落细胞学》。
2. DIAGNOSTIC PATHOLOGY: CYTOPATHOLOGY, SECOND EDITION.
3. Atlas of CYTOPATHOLOGY.
4.《病理医师实用组织学》第5版。
5. Practical Pathology of Serous Membranes.
6.《浆膜腔积液和脑脊液细胞病理学图谱》。
7. Webpathology网站。